ELISA консумативи

Tehnica Imunoenzimatica ELISA in microplaca

Principiul Testului

fig 2

  • Stripurile din microplaca din polistiren captusite cu antigeni purificati si caractererizati biochimic,sunt utilizate drept faza solida care contine antigeni legati.
  • Dacă proba este pozitivă, anticorpii specifici din proba de ser diluat se ataseaza la antigenii cuplati in faza solidă
  • In etapa a doua, anticorpii atașati sunt detectati cu anticorpi anti-umani marcați cu peroxidază
  • În a treia etapă, anticorpii legați devin vizibili folosind o soluție cromogen / substrat care este capabila de a stimula o reacție de culoare. Intensitatea culorii produsă este proporțională cu concentrația de anticorpi din proba de ser
  • Testul ELISA monospecific (test imunoenzimatic cu un singur antigen) furnizează un test cantitativ in-vitro pentru detectarea anticorpilor. “Profile ELISA” furnizeaza un test semicantitativ in-vitro pentru detectarea anticorpilor diferiti pe un singur strip din microplaca.
  • Faza solidă a “Pool ELISA” este acoperita cu un amestec de antigen pentru detectarea semicantitativa a anticorpilor a caror specificitate trebuie investigata ulterior prin teste monospecifice.

 

Calibrarea/Evaluarea – etape ale testarii sigure si economice

  • In cazul unei metode cantitative ELISA, calibrarea este efectuată in general cu trei seruri de calibrare:

   Serul de calibrare 1: limita superioară a intervalului de măsurare

Serul de calibrare 2: limita superioară a intervalului valorilor normale(valoare cut-off)

   -Serul de calibrare 3: negativ

fig 3

  • Nu este nevoie pentru incubare de valori blank sau determinări duplicat
  • Metoda semicantitativă ELISA se realizeaza folosind un singur calibrator. Curbele de calibrare extinse se gasesc in unele metode ELISA pentru determinarea imunității sau diagnosticare CSF.
  • Calibrarea se realizează în unități relative (RU / ml) sau, în cazul în care există un ser de referință internațional, în unități internaționale (UI / ml).
  • Fiecare test poate fi efectuat în mod opțional folosind un ser de control pozitiv sau negativ inclus în kit-ul de testare. Intervale de referință specifice ale kit-ului sunt prevăzute pentru fiecare calibrator si ser de control
  • Toate metodele de calibrare pot fi de obicei efectuate cu usurinta cu ajutorul software-ul ELISA

 

 

 Usor, economic si rapid de utilizat

  • Stripurile microplacii contin godeuri detasabile (cu exceptia Profile ELISA)
  • Pentru a evita amestecarea, benzile microplacii sau godeurile cu reactivi sunt tipărite cu abrevierile antigenilor
  • Reagentii sunt gata de lucru (exceptie tampon de spalare: concentrat)
  • Codificarea culorilor permite identificarea clara a reagentilor:

rosu inchis: ser de calibrare 1
rosu: ser de calibrare 2;
rosu deschis: se de calibrare 3;
-albastru inchis: ser de control pozitiv;
-verde: ser de control negativ;
tamponul dilutie proba si conjugatul anti-uman Ig POD: diferite culori;

  • Tamponul de proba pentru serologia infecțioasa ELISA (detectarea anticorpilor de clasă IgM) conține deja un absorbent IgG / RF.
  • Compatibil cu toate sistemele de spălare și cititoarele comerciale