Avantaje

• Sensibilitate și specificitate ridicate – amorse și sonde optimizate pentru detecția precisă a PPRV.
• Control intern integrat – semnalează inhibiția PCR și problemele din etapa de extracție.
• Rapiditate – rezultate în sub o oră, potrivit pentru screening urgent și situații de focar.
• Versatilitate – compatibil cu termocicloarele real-time uzuale din laborator.
• Robustețe – tolerant la inhibitori, cu rezultate reproductibile între serii.
• Flux de lucru unitar – toate componentele provin din același sistem, fără combinarea reactivilor din surse diferite.

Protocol de lucru

1. Extracția ARN din probele biologice, cu un kit de extracție dedicat (achiziționat separat).
2. Pregătirea reacției RT-qPCR: combinați master mixul cu control intern, amorsele și sondele PPRV și ARN-ul extras.
3. Amplificarea în timp real, pe termociclorul real-time disponibil în laborator, conform programului de ciclare recomandat.
4. Validarea run-ului cu ajutorul controlului pozitiv, pentru confirmarea performanței reacției.
5. Interpretarea rezultatelor pe baza curbelor de amplificare exponențiale și a valorilor Ct, cu verificarea semnalului de control intern în fiecare probă.

Controale 

• Control pozitiv (PC) – verifică sensibilitatea și buna funcționare a reacției.
• Control negativ (NTC) – apă liberă de nucleaze, pentru detectarea contaminării.
• Control intern (IC) – monitorizează inhibitorii și eficiența extracției.
• Control de extracție – probă negativă procesată în paralel, pentru excluderea contaminării încrucișate.